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當前位置:首頁  >  技術文章  >  細胞增殖-毒性檢測實驗步驟

細胞增殖-毒性檢測實驗步驟

更新時間:2019-04-04  |  點擊率:1601

CCK8試劑盒,是用于測定細胞增殖或毒性實驗中活細胞數目的一種高靈敏度,無放射性的比色檢測法。CCK法應用非常廣泛,如藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗以及生物因子的活性檢測等。下面培養箱&試劑盒為例,簡要說明細胞增殖-毒性檢測的操作步驟

方法/步驟

  1. 在96孔板中配制100μl的細胞懸液。將培養板在電熱恒溫培養箱預培養 24 小時 (在 37℃,5% CO2 的條件下)。
  2. 向培養板加入 10μl 不同濃度的待測物質。
  3. 將培養板在培養箱孵育一段適當的時間 (例如: 6,12, 24 或 48 小時)。
  4. 向每孔加入 10μl CCK8 溶液(engreen) (注意不要在孔中生成氣泡,它們會影響 OD 值的讀數)。

5. 將培養板在電熱恒溫培養箱內孵育 1-4 小時。

  1. 用酶標儀測定在 450 nm 處的吸光度。
  2. 如果暫時不測定OD值,打算以后測定的話,可以向每孔中加入10μl 0.1 M HCl溶液或者1%w/vSDS 溶液,并遮蓋培養板避光保存在室溫條件下。在24小時內吸光度不會發生變化。


 

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